Synopsis
Dies ist ein Handbuch, das Schülern die Möglichkeit geben soll, den Prozess und die Techniken der Charakterisierung und Reinigung eines Proteins und des anschließenden Klonens des assoziierten Gens zu erkunden. Jedes Kapitel betont den Entdeckungsprozess und die Strategien und Rationale für jedes Experiment. Um Kosten zu minimieren und eine umfangreiche Laborvorbereitung zu vermeiden, verwenden die Experimente in diesem Handbuch leicht verfügbare Materialien und Organismen, das Bakterium Escherichia coli und die Hefe Saccharomyces carlsbergensis. Laborthemen umfassen: mikrobiologische Methoden (Handhabung, Lagerung, Medien); Organismuswachstum und Proteinproduktion; Enzym- und Proteinaufsätze (spezifische Aktivität); Chargenreinigung von Proteinen; Gelfiltration und Ionenaustauschchromatographien; genomische und Plasmid-DNA-Isolation; und DNA-Sequenzierung und Computeranalyse.
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