A Laboratory Guide to Genomic Sequencing: The Direct Sequencing of Native Uncloned DNA - Couverture souple
Synopsis
A Safety Considerations Genomic Sequenzierung beinhaltet eine Reihe von gefährlichen Schritten, wie Hochstrom, Hochspannung, radioaktive und hochgiftige Chemikalien. Es ist daher absolut, dass die Anweisungen der Gerätehersteller befolgt werden und dass den lokalen und bundesstaatlichen Sicherheitsvorschriften besondere Aufmerksamkeit geschenkt wird. EINFÜHRUNG 9 B Einführung Während des Klonens genomischer DNA gehen viele ihrer Eigenschaften perma nicht verloren. Es war daher notwendig, eine neue Technik zu entwickeln, die uns einen genaueren Blick auf ein Gen in seiner normalen Umgebung geben würde. Die leistungsstarke Technik der genomischen Sequenzierung, die zuerst von Church und Gilbert (1984) beschrieben wurde, ermöglicht nun eine genaue Ansicht einer bestimmten DNA-Sequenz in einem Chromosom. Diese Methode kombiniert das chemische DNA-Sequenzierungsverfahren von Maxam und Gilbert (1980) mit dem Nachweis von DNA-Sequenzen durch Elektrolotting und indirekte Endmarkierung durch Hybridisierung. Neben Studien zum Methylierungszustand einzelner Basen in einem bestimmten Gen (Nick et al. , 1986; Saluz und Jost, 1986; Saluz et al. , 1986) kann die genomische Sequenzierung auch verwendet werden, um spezifische DNA-Protein-Interaktionen in vivo zu untersuchen (Church et al. , 1985; Giniger et al. , 1985; Becker et al. , 1986; Ephrussi et al. , 1985; Martin et al. , 1986; Nick et al. , 1986; Zinn und Maniatis, 1986).
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